sod检查作用(测定sod活性有何生理意义)

sod检查作用(测定sod活性有何生理意义)

健康|养生彩彩2024-04-27 5:05:23431A+A-

测定sod活性有何生理意义

sod蜜是一种源于生命体的活性物质,因此sod蜜就是含有此类成分的护肤品,主要用于天气干燥的时候,其中添加的矿油成分可以溶解油脂、隔离空气,因此涂在肌肤上会快速形成一层保护膜,防止干燥的空气带走肌肤的水分,同时还能隔绝粉尘、吸光吸热。

功效

1、滋养肌肤:sod蜜中添加了人参、黄芪这类珍贵成分,能够起到很好的滋养肌肤的作用。

2、保湿:矿油成分所形成的保护膜,可以有效防止肌肤的水分流失,保证肌肤的水分充足。

3、补水:sod蜜也具有很好的补水效果,给肌肤持续补充水分,可以有效防止肌肤干燥、起皮、龟裂等。

影响sod活性测定的因素有哪些

以检测血液中SOD的活性为例:

1.取小鼠新鲜血液500 微升置于4mL 生理盐水中, 混匀, 1500 r/m in 离心5m in, 弃上清液, 将沉淀用生理盐水洗涤3 次, 弃去上清液, 加入2 mL 双蒸水, 搅拌, 然后依次再加入冷乙醇1 mL , 氯仿1 mL , 4000 r/m in 离心15 m in,

弃沉淀, 上清液即为红细胞(RBC) SOD 抽提液, 供测SOD 活性使用.

2. 连苯三酚自氧化速率的测定.  在3 cm 光径比色皿中加入9 mL 50mmol/L , pH 8. 2 Tris HCL 缓冲液后, 放入721 分光光度计, 于420 nm 处调OD 值为0 作为对照后, 加入适量100mmol/L 连苯三酚溶液搅匀, 以加入时为零点, 每隔30 s 测OD 值一次, 要求自氧化速率控制在0.070 OD/m in 左右.

3. 红细胞SOD 抽提液的活力测定.  首先测连苯三酚的自氧化速率, 而后向

Tris-HCL 缓冲液中加样, 同时适当减少缓冲液, 使反应总体积保持为9 mL , 其余操作不变, 记录OD 值, 计算加入红细胞SOD 抽提液后的自氧化速率.

4. SOD 标准品活性的测定.  盛有SOD 标准品冻干粉的安瓿瓶打开后, 注入1 mL 双蒸水, 充分溶解, 用微量进样器取适量, 稀释后, 作为待测样, 加入相应体积的T ris2HCL 缓冲液使总体积为9 mL ,测定同上.

5. 酶活性的计算公式.

单位体积活性(u·mL - 1) = (原自氧化速率- 加样后速率)/

(原自氧化速率×0. 5) × 1/(加样量(mL ) ×反应液总体积(mL ) ×样液稀释倍数

式中, 每毫升反应液中, 每分钟抑制连苯三酚自氧化速率50% 的酶量为一个酶活性单位.

sod活性测定注意事项

SOD能抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O₂,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。

而SOD可清除O₂,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。

测定sod的原理是什么

测定SOD的方法除少数采用直接法外,一般多为间接法。1.直接法原理是根据O2或产生O2的物质本身的性质测定O2的歧化量,从而确定SOD的活性。

经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用。

2.一般化学法这些方法的共同特点是要有一个O2的产生体系和一个被O2还原或氧化的可检测体系。

在SOD存在下,一部分O2被SOD歧化,因而O2还原或氧化检测体系的反应受到抑制。

根据反应受抑制程度,测定SOD的活性。

一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、没食子酸法、6-羟多巴胺法、亚硝酸盐形成法和碱性二甲亚砜法。

测定sod活性有何生理意义和作用

SOD:超氧化物歧化酶(英语:Superoxide dismutase,别名肝蛋白、奥谷蛋白,简称SOD)是一种能够催化超氧化物通过歧化反应转化为氧气和过氧化氢的酶。

它广泛存在于各类动物、植物、微生物中,是一种重要的抗氧化剂,保护暴露于氧气中的细胞。

SOD测定意义

串叶松香草中SOD和类SOD化合物的条件,即在pH 7.0,料液比1:7.5,提取温度30℃水浴,浸提12h的条件下,串叶松香草水提液的活性最高,可达到31.05U/ml,换算为干物料的活性值为232.91U/g。 对串叶松香草水提液同时进行了类SOD活性物质的含量测定。采用标准曲线法,分别选取黄酮类化合物、多酚类化合物和维生素C三种进行含量测定,根据实验测定三类物质在串叶松香草水提液中的含量分别为黄酮化合物7.9mg/g,多酚化合物3.84mg/g,维生素C 1.26mg/g

sod活性正常范围

串叶松香草中SOD和类SOD化合物的条件,即在pH 7.0,料液比1:7.5,提取温度30℃水浴,浸提12h的条件下,串叶松香草水提液的活性最高,可达到31.05U/ml,换算为干物料的活性值为232.91U/g。 对串叶松香草水提液同时进行了类SOD活性物质的含量测定。

采用标准曲线法,分别选取黄酮类化合物、多酚类化合物和维生素C三种进行含量测定,根据实验测定三类物质在串叶松香草水提液中的含量分别为黄酮化合物7.9mg/g,多酚化合物3.84mg/g,维生素C 1.26mg/g

SOD活性的测定

超氧化物歧化酶(SOD)的催化底物是O2,一般多以一定时间内产物生成量或底物的消耗量作为酶活性单位。由于O2自身很不稳定,且不易制备,测定SOD的方法除少数采用直接法外,一般多为间接法。1.直接法原理是根据O2或产生O2的物质本身的性质测定O2的歧化量,从而确定SOD的活性。经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用。2.一般化学法这些方法的共同特点是要有一个O2的产生体系和一个被O2还原或氧化的可检测体系。在SOD存在下,一部分O2被SOD歧化,因而O2还原或氧化检测体系的反应受到抑制。根据反应受抑制程度,测定SOD的活性。一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、没食子酸法、6-羟多巴胺法、亚硝酸盐形成法和碱性二甲亚砜法。常用的有:⑴邻苯三酚自氧化法:即改良Marklund法。原理是基于经典的分光光度法,在碱性条件下,邻苯三酚自氧化成红桔酚,用紫外-可见光谱跟踪波长为325nm、420nm或650nm(经典为420nm),同时产生O2,SOD催化O2发生歧化反应从而抑制邻苯三酚的自氧化,样品对邻苯三酚自氧化速率的抑制率,可反映样品中的SOD含量。本法具有特异性强,所需样本量少(仅50μl),操作快速简单,重复性好,灵敏度高,试剂简单等优点。⑵细胞色素C还原法(McCord法):原理是黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系中产生的O2使一定量的氧化型细胞色素C还原为还原型细胞色素C,后者在550nm有最大光吸收。在SOD存在时,由于一部分O2被SOD催化而歧化,O2还原细胞色素C的反应速度则相应减少,即其反应受到抑制。将抑制反应的百分数与SOD浓度作图可得到抑制曲线,由此计算样品中SOD活性。本法是间接法中的经典方法,但本法灵敏度较低。3.化学发光法原理是黄嘌呤氧化酶在有氧条件下,催化底物黄嘌呤或次黄嘌呤发生氧化反应生成尿酸,同时产生O2。后者可与化学发光剂鲁米诺反应,使其产生激发。SOD能清除O2从而抑制鲁米诺的化学发光。本法可应用于SOD的微量测定,不仅灵敏度高,简便易行,而且特异性与准确性至少与细胞色素C还原法类似。4.免疫学方法上述方法测定的是SOD活性,免疫学方法则可测定样品中SOD的质量,因此特异性较好,是较理想的测定SOD方法,免疫法有放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等。但其缺陷是只能测定抗体相应的抗原,对于检测不同种类的SOD,则须制备相应的特异性抗体,手续繁琐。5.电泳法电泳染色定位法的基本原理是根据光化学法与NBT还原法。电泳则采取垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳。既可采用SOD活性正染色(呈现棕色区带)也可采取SOD活性负染色(呈现无色透明区带)。根据凝胶上电泳分离的SOD区带的着色深浅与面积大小,对样品进行半定量分析,也可制作校正曲线计算样品中的SOD含量。染色定位法常用于鉴定SOD,很少为了定量,主要原因是它不及化学法简便,但鉴定SOD却较化学法为优。用电泳法可鉴定SOD是否掺有杂质蛋白,有无同工酶,且可半定量地确定SOD的活性大小。6.平行放在距20W荧光灯管3cm处的光照台上,光照8min后,立即在200A分光光度计的460nm波长下比色。用测得的结果计算样品中的SOD含量..

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